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          探針法熒光定量PCR試劑盒試驗(yàn)結(jié)果如何計(jì)算

          更新時(shí)間:2024-03-12      瀏覽次數(shù):1534
          本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體的樣本中指標(biāo)含量。
          芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒性能:
          1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
          2.靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0U/L。
          3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
          4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
          5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
          6.有效期:6個(gè)月。
          實(shí)驗(yàn)原理:
          本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定指標(biāo)水平。用純化的指標(biāo)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入相關(guān)指標(biāo),再與HRP標(biāo)記的指標(biāo)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中指標(biāo)濃度。
          計(jì)算:
          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
           
           
           
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